實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)是一項以PCR反應為基礎的DNA定量技術,通過對目標基因在擴增過程中產生的拷貝數進行實時的定量,從而達到對目的基因的定性和定量分析。常用的對PCR產物進行熒光定量檢測的方法有兩種:一種是利用熒光染料與雙鏈DNA結合,通過熒光強度進行定量;另一種是利用攜帶了熒光報告基團的特異DNA探針對目標基因進行定量。
技術優勢
1.實驗過程透明,結果真實可靠。
2.豐富的qPCR實驗操作經驗,確保您在極短的時間里得到真實可靠的實驗結果。
3.強大的技術支持團隊,為您的科研道路保駕護航。
服務流程
1.樣品RNA的抽提。
2.RNA質量檢測。
3.樣品cDNA合成。
4.梯度稀釋的標準品及待測樣品的管家基因(β-actin)實時定量PCR。
5.制備用于繪制梯度稀釋標準曲線的DNA模板。
6.待測樣品的待測基因實時定量PCR。
7.實時定量PCR使用引物列表。
8.電泳。
9.數據分析及報告交付。
樣品要求
1.細胞樣品:收集細胞后放入液氮中速凍保存或速東24h后轉入-80℃冰箱保存;收集細胞后,視細胞量,直接加入1~1.5mL Trizol溶解裂解細胞,再轉入-80℃冰箱保存。
2.組織樣品:動物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存,液氮凍存24h后可轉入-80℃冰箱保存;組織樣品同樣可以采用Trizol溶解裂解后放入-80℃冰箱保存。特殊組織(植物等)建議采用新鮮組織即刻提取RNA,逆轉合成cDNA后-20℃保存備用。所有樣品的處理和保存過程中,切總反復凍融。
注:樣品運輸條件:樣品運輸條件根據實驗樣品的處理條件,可以選擇液氮或者干冰運輸。
發貨內容
1.熒光定量所有原始結果(包括RNA濃度及純度檢測數據,qPCR原始數據,擴增曲線及熔解曲線圖)。
2.詳細的實驗報告(包括實驗原理,實驗方法,儀器,試劑,引物或探針序列,數據分析結果等)。